采用ITS/ITS2条形码鉴定羌活药材的准确性与稳定性研究

来源 :海峡两岸暨CSNR全国第10届中药及天然药物资源学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lilinchang0105
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  本文首次对ITS/ITS2条形码鉴定羌活药材的稳定性与准确性进行研究,选用31份羌活药材样本,提取基因组DNA,通过PCR扩增ITS序列,PCR产物双向测序,所得序列采用CodonCode Aligner进行拼接。ITS2序列采用基于隐马尔可夫模型的HMMer注释方法获得。混伪品序列下载自GenBank。采用MEGA5.0软件对羌活药材及其混伪品进行序列比对,计算种内和种间距离,构建邻接(NJ)树。结果表明,羌活药材ITS序列长度为603-604bp,ITS2序列长度均为228bp,羌活药材ITS/ITS2序列单倍型与其两种基原植物叶片序列一致,并全部涵盖GenBank中相应物种提交的序列。二者种内平均K2P距离均远远小于其与混伪品的种间平均K2P距离;邻接(NJ)树显示羌活药材基原植物羌活、宽叶羌活与其混伪品均可明显区分,表现出良好单系性。因此ITS/ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别羌活药材,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要的分子依据。
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