一种结合MLPA和荧光探针溶解曲线分析的HPV分型检测方法的建立

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目的:在传统多重连接探针扩增(MLPA)的基础上结合荧光探针溶解曲线分析,建立一种更为方便的HPV分型方法。方法:针对10种常见HPV亚型的特异性基因片段设计MLPA探针,在不同MLPA探针上增加不同溶解温度(Tm)的荧光探针结合片段,通过溶解曲线分析时不同荧光探针的溶解峰有无判断不同HPV亚型。结果:通过荧光探针的溶解峰可直接观察MLPA探针扩增与否,进而判断对应的HPV亚型。与传统的MLPA结果分析方法如毛细管电泳或琼脂糖电泳相比有相同的准确度,且无开盖污染风险。该HPV亚型检测方法准确率与导流杂交方法结果基本一致。结论:成功建立了一种结合MLPA和溶解曲线分析的HPV分型检测方法。
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