【摘 要】
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目的:运用胶原染色、苦杏酸天狼星红染色、免疫组化方法及透射电镜观察骶3神经电调节对脊髓损伤(SCI)大鼠逼尿肌细胞凋亡及膀胱纤维化影响。方法:将雌性成年SD大鼠45只随机分
【机 构】
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杭州市第三人民医院; 浙江省人民医院;
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目的:运用胶原染色、苦杏酸天狼星红染色、免疫组化方法及透射电镜观察骶3神经电调节对脊髓损伤(SCI)大鼠逼尿肌细胞凋亡及膀胱纤维化影响。方法:将雌性成年SD大鼠45只随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、电针治疗组(C组),每组15只。采用脊髓横断法建立大鼠神经源性膀胱的模型。模型组与电针治疗组造模成功后均进行电极植入;电针治疗组进行电调节治疗,每日1次,连续治疗2w;正常组仅常规饲养。3组大鼠在电针治疗组治疗2周后同时处死取材,采用HE染色观察膀胱病理改变;采用胶原染色、苦杏酸天狼星红染色、免疫组化方法来观察逼尿肌纤维化程度(胶原纤维含量、Ⅰ/Ⅲ型胶原比例);采用透射电镜观察逼尿肌细胞调亡情况及超微结构改变。结果:胶原染色及苦杏酸天狼星红染色观察,C组同B组相比,平滑肌细胞之间胶原纤维的数量明显减少,细胞排列规则。免疫组化观察C组膀胱组织的CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达(0.200±0.447,4.000±1.414)均明显低于B组(4.600±2.966,8.400±1.342),C组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例较B组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。通过电镜观察膀胱逼尿肌超微结构,发现经电针治疗后,C组与B组相比,逼尿肌细胞表面平滑,排列均匀,胞浆内线粒体结构完整,无肿胀破裂现象,细胞结构接近于正常组。结论:骶3神经电调节能抑制膀胱逼尿肌间质中胶原纤维的表达,减少脊髓损伤后大鼠逼尿肌细胞的凋亡,其机制是电调节改善了逼尿肌超微结构,缓解逼尿肌纤维化,从而延缓逼尿肌细胞凋亡,促进膀胱功能恢复。
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