【摘 要】
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目的探讨在柚皮苷单体中药环境中,微应变对体外培养的大鼠成骨细胞增殖与分化的影响及机制。方法体外培养大鼠原代成骨细胞,接种于力学加载载体硅橡胶膜上,利用EF3200力学试
【机 构】
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天津医院中西医结合骨科研究所细胞工程室;
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目的探讨在柚皮苷单体中药环境中,微应变对体外培养的大鼠成骨细胞增殖与分化的影响及机制。方法体外培养大鼠原代成骨细胞,接种于力学加载载体硅橡胶膜上,利用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应系统,在浓度为20ng/ml的柚皮苷环境下,对细胞进行周期性循环牵张微应变加载。实验分为A组:空白对照组;B组:单纯含柚皮苷20ng/ml的培养组;C组:单纯牵张微应变加载组,应变大小分别为5%与10%;D组:含柚皮苷20ng/ml的中药培养环境下,联合加载牵张微张应变分别为5%与10%。应用流式细胞仪检测各组成骨细胞的增殖活性。RT-PCR检测各组细胞骨钙素(CON)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Runx2的基因表达。结果浓度为20ng/ml柚皮苷培养环境对成骨细胞的增殖没有影响(P>0.05),单纯的力学刺激以及柚皮苷与力学刺激联合作用下,能够显著的促进成骨细胞的增殖(P<0.05)。单纯的柚皮苷环境以及单纯的力学刺激环境均抑制成骨细胞OCN基因表达。但柚皮苷浓度为20ng/ml联合5%的微应变环境下,明显增强了OCN的表达(P<0.01)。单纯的5%微应变刺激能明显增强Runx2基因的表达(P<0.01);而联合柚皮苷与力学刺激同时作用时,对Runx2基因表达并没有产生影响。结论微应变环境能明显促进体外培养成骨细胞的增殖活性;柚皮苷中药环境与微应变加载能够促进体外培养成骨细胞的分化功能。
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