【摘 要】
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目的:构建人源性抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库,筛选具有中和活性的人源性单克隆抗体,为EV71感染引起的手足口病的临床诊断及防治奠定基础.方法:从16名成人志愿者中筛选出曾经感
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目的:构建人源性抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库,筛选具有中和活性的人源性单克隆抗体,为EV71感染引起的手足口病的临床诊断及防治奠定基础.方法:从16名成人志愿者中筛选出曾经感染过EV71病毒,且血清中和抗体效价为1:128的成人的外周血,分离其淋巴细胞,提取总RNA并逆转录为cDNA.以cDNA为模板,运用人源抗体Fab段基因引物扩增出人源抗体轻链及重链Fd区,分步克隆至pComb3载体,使用辅助噬菌体VCSM13感染重组大肠杆菌XL1-Blue,对Fab噬菌体抗体库进行包装.
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