亲水纳流液相色谱技术及其在蛋白组学分析中的应用

来源 :第21届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengliang109
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纳流液相色谱已成为现代蛋白质组学研究常规的分离工具.基于C18材料的反相液相色谱法可以提供高分辨的多肽/蛋白分离,很好地满足后端的质谱检测以及最终的蛋白鉴定.需要指出,反相色谱更适合于疏水多肽/蛋白的高分辨分离,而对于亲水性多肽/蛋白则显现出保留性差的缺点,无法有效分离并影响到后端质谱的鉴定.蛋白质组学体系的复杂性需求更丰富选择性的色谱分离.近年兴起的亲水作用色谱对于亲水多肽/蛋白的分离展现出了优良的效果,不仅能实现亲水物质的有效保留,并可实现高分辨分离。本文报道了基于亲水材料的纳流液相色谱技术,并考察了其在复杂多肽混合物的分离效果。结果表明,随着柱长增加,色谱峰容量显著提升,多肽混合物获得高分辨的分离效果。也考察了不同条件下峰容量的极限值。这一结果不仅为nanoHILIC-MS在蛋白组学研究中的应用提供了可行性探索,更重要的是,nanoHILIC-MS还将提供互补于nanoRPLC-MS的分离效果和蛋白鉴定本领,这将为Single Shot Proteomics技术提供新的分析工具。
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