棉铃虫浓核病毒NS和VP蛋白的细胞定位分析

来源 :中国植物保护学会成立50周年庆祝大会暨2012年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shilinjun2000
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  浓核病毒隶属于细小病毒科,浓核病毒亚科,是一类很小的DNA单链病毒,基因组大小4~ 6kb,末端存在发卡结构;病毒粒子无囊膜,直径18 ~ 26nm,成正二十面体状.本实验室在棉铃虫体内发现了一种新的浓核病毒,命名为HaDNV-1.读码框分析表明,HaDNV-1基因组含有3个读码框,分别编码NS1、NS2和VP.本研究将编码NS1蛋白、NS2蛋白和VP蛋白的读码框分别克隆到IF2启动子驱动的GFP+载体上,分别转染棉铃虫细胞系(Ha cell-line)和斜纹夜蛾细胞系(SL-hp cell-line).结果表明两种细胞系中NS1蛋白和NS2蛋白定位于细胞核,而VP蛋白存在于细胞核和细胞质,成功表达上述蛋白的细胞与正常细胞相比无病变;说明HaDNV-1的NS1和NS2蛋白类似于其他浓核病毒的同类蛋白,含有核定位信号序列,而VP蛋白则同时具有核定位信号序列和出核序列.LMB (Leptomycin B)处理能阻止HaDNV-1的VP蛋白出核,表明HaDNV-1病毒粒子可能依赖细胞出核因子进行出核扩散,而不对宿主细胞本身造成很大影响.
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