【摘 要】
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为优化当前白斑综合征病毒(WSSV)定量检测方法,本研究结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方
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为优化当前白斑综合征病毒(WSSV)定量检测方法,本研究结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方法进一步探明WSSV在脊尾白虾体内的增殖规律及致病性。研究方法如下：首先根据WSSV的囊膜蛋白VP28基因序列设计了两对特异引物(F1,R1)和(RF2,RR2),分别用于标准品质粒的构建和扩增子的扩增,以开展SYBR Green染料法定量检测WSSV的研究；随后利用该定量检测方法分析了WSSV在脊尾白虾体内的组织分布及感染规律。研究结果显示：(1)以定量引物RF2和RP2建立的SYBR Green绝对定量检测方法具有敏感度高、特异性强、定量范围广且准确等特点；(2)正常青蟹感染WSSV,首先经过一个约48h潜伏期,而后开始大量增殖并造成部分青蟹死亡,而病毒感染早期青蟹体内抗病因子PX高水平表达,表明该抗病因子参与青蟹的早期抗病毒免疫反应。
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