【摘 要】
：
目的：研究下调长链非编码RNA-UCA1的表达对胃癌BGC-823细胞周期、凋亡、增殖、迁移、侵袭能力及对PI3K-Akt-mTOR信号通路调控的影响.方法：以胃癌BGC-823细胞与正常胃黏膜上皮GES-1细胞为研究对象，利用qRT-PCR检测细胞株UCA1的相对表达水平.应用慢病毒转染技术筛选UCA1干扰BGC-823细胞株.通过流式细胞技术检测UCA1干扰对BGC-823细胞周期和凋亡的影响
【机 构】
：
东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏,南京,210009
论文部分内容阅读
目的：研究下调长链非编码RNA-UCA1的表达对胃癌BGC-823细胞周期、凋亡、增殖、迁移、侵袭能力及对PI3K-Akt-mTOR信号通路调控的影响.方法：以胃癌BGC-823细胞与正常胃黏膜上皮GES-1细胞为研究对象，利用qRT-PCR检测细胞株UCA1的相对表达水平.应用慢病毒转染技术筛选UCA1干扰BGC-823细胞株.通过流式细胞技术检测UCA1干扰对BGC-823细胞周期和凋亡的影响，并采用MTT和划痕实验分别检测UCA1干扰BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化.Western Blot检测参与肿瘤调控的PI3K-Akt-mTOR信号通路关键蛋白的表达，并综合分析下调UCA1对BGC-823细胞功能和调控机制的影响.结果：胃癌BGC-823细胞与GES-1细胞UCA1表达水平结果显示：UCA1在BGC-823细胞中呈高表达，上调30.810倍.流式细胞技术检测结果提示：UCA1干扰对BGC-823细胞周期S期和G2期产生明显影响；且可显著促进胃癌细胞凋亡.MTT和划痕实验结果显示：UCA1干扰可显著降低BGC-823细胞株的增殖能力.蛋白水平检测结果显示：PI3K和AKT3的蛋白表达水平降低，差异有统计学差异(P＜0.05)；BCL-XL和PTEN的蛋白表达水平均升高，差异有统计学差异(P＜0.05).结论：下调长链非编码RNA-UCA1表达能抑制BGC-823细胞增殖和侵袭转移能力，并可促进胃癌BGC-823细胞凋亡，其对细胞功能的影响可能与UCA1对PI3K-Akt-mTOR信号通路的调控有关.
其他文献
目的：利用核磁共振(NMR)的代谢组学方法分析苯并(a)芘对大鼠肝脏内源性代谢物质的变化规律，寻找潜在生物标志物，为研究苯并(a)芘毒性及其毒作用机制提供依据.方法：选择健康SD大鼠24只，随机分为溶剂对照组(橄榄油)、低剂量组(1mg/kg)、中剂量组(2.5mg/kg)、高剂量组(6.25mg/kg)，经腹腔注射染毒，每天1次，每周连续注射5天，连续3周.取大鼠肝脏组织进行核磁共振氢谱(1H-
目的：探讨lncRNA在PM2.5急性染毒支气管上皮细胞16HBE过程中的表达改变及功能作用.方法：采集广州市区大气细颗粒物PM2.5并做成分分析,以不同剂量及不同时间急性染毒支气管上皮细胞16HBE细胞,CCK-8法检测细胞活力,EdU法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,通过lncRNA表达谱芯片分析筛选差异表达基因,利用RNAi方法验证所筛选的差异基因的功能作用.结果： PM2.
目的：砷是一种常见的环境和职业毒物，其在毒性敏感性方面存在种属差异，但在毒理学常用模式动物小鼠中是否存在品系差异尚不清楚.本研究探讨常用近交系品系小鼠C57BL/6 (B6)和129X1/SvJ (129)对急性砷毒性易感性和砷代谢的差异，为进一步研究砷的毒作用机制提供了基础数据.材料和方法： 采用鼠龄8-12周的雄性B6和129小鼠(体重20-25克)，随机将动物分为对照组(生理盐水)、6小时处
目的：在前期纳米二氧化钛对RAW264.7细胞miRNAs表达谱分析的基础上，进一步对与纳米二氧化钛毒性密切相关的miR-29b开展生物学功能及调控机制研究.方法 应用100 μ g/ml 21nm纳米二氧化钛对RAW264.7细胞染毒后，运用qRT-PCR检测miR-29b的表达量，和测序结果进行比较分析.并通过生物信息学软件DIANA-mirPath对miR-29b进行信号通路分析，经转染mi
目的：人暴露于空气动力学直径小于2.5μ m的颗粒物质(PM2.5)会对呼吸系统造成损伤,并伴随凋亡、自噬等生物过程的发生,对健康造成不良影响.本研究探讨在细胞水平, PM2.5暴露对人支气管上皮细胞(HBE)自噬等细胞表型的影响.方法：将状态良好的HBE细胞种入六孔板,当细胞密度达到50％至70％时分组进行染毒：阴性对照组(正常DMEM培养基培养),阳性对照组(含500nmol/ml雷帕霉素和1
目的：探讨1.0 μmol/L亚砷酸钠长期作用于人支气管上皮细胞(HBE细胞)、人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞),致使细胞发生恶性转化过程中内质网凋亡通路相关蛋白在不同阶段的动态变化.方法：以实验室前期建立的HBE、HaCaT细胞恶性转化模型为研究对象,利用western blotting检测内质网凋亡通路相关蛋白的改变.结果：随着染毒代数的增加, CHOP的蛋白水平呈明显的下降趋势,P-JN
目的：探讨Nrf2-NQO1信号通路在砷致人支气管上皮细胞(HBE细胞)恶性转化中对顺铂敏感性的作用.材料与方法：以1.0 μ mol/L亚砷酸钠长期染毒HBE细胞,43代细胞发生恶性转化.采用RNA干扰技术分别降低恶性转化细胞中Nrf2和NQO1的表达,利用Western blotting检测Nrf2、NQO1蛋白的表达,MTT法检测过氧化氢对HtBE细胞的增殖抑制作用,MTT法检测顺铂对细胞的
目的：随着微波技术的广泛应用，微波辐射引发的健康威胁备受关注.脑是微波辐射损伤最敏感的靶部位，而线粒体是最早累及的细胞器之一.本课题组前期研究建立了微波辐射致神经元线粒体损伤的模型，发现微波辐射后神经细胞中HIF-1α表达增加，其激活可改善线粒体功能.但微波辐射后HIF-1α影响线粒体功能的调控机制未明，作用靶点不清.Akt/mTOR通路是一条与HIF-1α蛋白表达和增强HIF-1稳定性密切相关的
目的：研究心肌细胞内Ca2+和ROS含量在不同剂量微波实时辐射后改变情况,为阐明微波辐射致心肌细胞损伤的机制、寻找敏感指标和防治提出新思路。方法：培养的原代乳鼠心肌细胞分为3组：正常对照组、4W/Kg微波辐射组和60W/Kg微波辐射组。于辐射前将ROS、胞浆内游离Ca2+分别复染于3组细胞内；另将内质网和线粒体中Ca2+分别复染于新的3组细胞内。将上述细胞放置于微波实时照射装置进行辐射,辐射剂量分
目的：本研究选取10-(2,5---羟基苯基)-10-氢-9-氧杂-10-磷酰杂菲-10-氧化物(DOPO-HQ)作为PBDEs潜在的替代品,详细评估DOPO-HQ的毒性(包括水生、陆生和微生物毒性)、持久性和蓄积性,并与PBDEs以及典型的替代物进行比较,以期对其进行较全面的初步环境风险评估。方法：以欧盟REACH化学品注册系统的安全评估方法为基础[1],参照经济发展与合作组织(OECD)化学品