【摘 要】
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提取中国对虾肌肉组织蛋白样品,以载体两性电解质pH梯度等电聚焦为第一向,垂直SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,进行双向电泳,考马斯亮蓝染色后扫描获取凝胶图像并用PDQue
【机 构】
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浙江工商大学食品与生物工程学院,浙江杭州310035
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提取中国对虾肌肉组织蛋白样品,以载体两性电解质pH梯度等电聚焦为第一向,垂直SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,进行双向电泳,考马斯亮蓝染色后扫描获取凝胶图像并用PDQuest软件进行分析。通过对不同裂解液配方、等电聚焦程序和上样量等关键因素和环节的对比试验,建立和优化了中国对虾肌肉蛋白质组双向电泳相关技术体系。研究结果表明,裂解液中添加Tris和TBP,使用17cm pH值4～7的IPG胶条进行主动水化上样,聚焦时适当延长除盐时间,提高聚焦电压和功率,显著了提高双向电泳图谱的分辨率和重复性。研究结果为进一步探索中国对虾肌肉品质变化机制及差异蛋白质组学研究奠定了基础。
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