扦插和组织培养(微扦插)是木本植物主要的无性繁殖方法,三千多年前我国人民已经用插木法繁殖杨柳科的某些树种,但此时它只是单纯作为繁殖易生根树种的一种手段.本研究利用试管内长期继代培养和二步生根法，成功地诱导核桃品种试管生根。这一技术在6个成龄品种上应用，获得了60.5％-89.7%的生根率和2.0-3.6条／株平均根数的结果。同时，借鉴试管复幼诱导生根的经验，通过芽接或试管继代培养，获得幼化材料，再进行埋干处理，成功地诱导‘辽宁1号’核桃品种嫩枝扦插生根。生根率达78%以上。接着采用这种材料制备技术，诱使50余种难生根阔叶林植物产生不定根。以核桃为例，阐明了茎插穗不定根发生的组织学起源和分化发育过程。为了深入研究难生根木本植物不定根发生生理机制，建立了高效、同步和稳定性好的741杨叶片和核桃成熟或近成熟种实子叶不定根发生体系。对741杨不同发育状态、不同外值体以及生长调节剂IBA水平进行了系统的研究，确定了以741杨生根试管苗上的叶为材料，在1/2MS附加0.5mg/L IBA培养基中进行生根诱导。利用这一体系，生根时间集中诱导后6-8天，第8天生根率达到100%，平均生根条数为3.7条／叶，重复试验的结果表明该体系具有较好的稳定性。同时，以核桃成熟或近成熟种实子叶为试材，在1/4DKW基本培养基上培养，近胚端的生根率达100%，而中部和远胚端的生根率为0。当培养基中附加一定水平的IBA(0.5～lOmg·L-1)时，子叶中、远胚端被诱导产生不定根；附加2mg·L-1 IBA其内源IAA的变化与子叶近胚端在1/4DKW基本培养基上发根时有相似的趋势；反之当培养基中附加6-BA抑制子叶生根，也抑制了与生根相关的IAA变化和蛋白表达。这一研究成果和不定根发生研究模式的建立，为从分子上深入认识木本植物不定根发生机制提供了条件。