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目的 建立一种基于液质联用技术进行蛋白质二硫键分析的方法。方法 先用特异性内切酶对蛋白质进行酶切，然后采用液质联用技术采集肽段的一级和二级质谱数据，再通过专用软件进行数据分析以确定蛋白质中二硫键的定位。结果建立了蛋白质二硫键的分析方法，用本方法不仅确证了样品G1型免疫球蛋白分子中的所有预期二硫键，还发现了样品中存在低丰度的错配二硫键。结论本方法对蛋白质分子中存在的预期的或错配的二硫键均可快速自动地进行定位分析，适用于蛋白药物的结构表征和质量控制。