【摘 要】
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目的旨在探讨脱淀粉蛋白DJ1（ProteinDeglycase1,DJ1）,能否通过调节氧化应激和细胞凋亡参与阿尔茨海默病（Alzheimer＆#39;s Disease,AD）的发生发展,为AD发病机制探究及干预靶点的筛选和确定提供理论依据。方法 SPF级7月龄的雄性APP/PS1双转基因小鼠40只,适应性喂养1周后随机均分为4组,将过表达或敲低的DJ1腺相关病毒载体通过脑定位手术,分别注射入两
【机 构】
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中国营养学会第十五届全国营养科学大会论文汇编
【出 处】
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中国营养学会第十五届全国营养科学大会
论文部分内容阅读
目的旨在探讨脱淀粉蛋白DJ1（ProteinDeglycase1,DJ1）,能否通过调节氧化应激和细胞凋亡参与阿尔茨海默病（Alzheimer＆#39;s Disease,AD）的发生发展,为AD发病机制探究及干预靶点的筛选和确定提供理论依据。方法 SPF级7月龄的雄性APP/PS1双转基因小鼠40只,适应性喂养1周后随机均分为4组,将过表达或敲低的DJ1腺相关病毒载体通过脑定位手术,分别注射入两组小鼠海马中,构建DJ1过表达或敲低的AD模型鼠,最终分为AD模型对照组（MC）、AAV载体对照组（NC）、DJ1过表达组（DJ1+）、DJ1敲低组（DJ1-）。术后21天,用Morris水迷宫和Barnes迷宫评估学习和记忆能力;HE染色、刚果红染色看海马病理及老年斑情况;蛋白质免疫印迹（Western Blot,WB）确定海马APP、p-Tau、DJ1、NRF2、Keap1、Caspase3等蛋白的表达;海马中Aβ40/42、DJ1和NRF2荧光双染共定位;试剂盒测海马和血清中氧化应激指标。结果 Morris水迷宫和Barnes迷宫结果一致,与MC相比,DJ1+潜伏期缩短而DJ1-增加;DJ1+平台穿越次数增加但DJ1-减少（P＜0.05）,训练期运动轨迹DJ1+趋于直线型而DJ1-呈边缘型,测试期DJ1+集中在目标象限;同时BDNF和CREB的表达,DJ1+明显高于DJ1-（P＜0.001）。与MC相比,DJ1-细胞固化萎缩,结构松弛;老年斑也显著增多（P＜0.05）;APP、p-tau、Aβ40/42表达增多（P＜0.001）,Aβ40/42共定位有63.26%的相关性,而DJ1+结果均相反。与MC相比,DJ1+组NRF2表达增加而DJ1-下降,同时DJ1和NRF2荧光强度显著增加（P＜0.001）,且共定位有90.24%的一致性;氧化应激相关的NRF2、NQO1、HO-1蛋白及T-SOD、T-AOC和GSH-PX,在DJ1+明显增加而在DJ1-下降,Ox-DJ1、Keap1和MDA,在DJ1+下降、DJ1-却增加（P＜0.001）;凋亡蛋白Caspase3和Bax,在DJ1+减少、DJ1-增加（P＜0.001）,而Bcl-2蛋白结果相反。结论 DJ1过表达可改善APP/PS1小鼠学习记忆和AD样病理,减轻其海马氧化应激和细胞凋亡水平,这可能与DJ1激活NRF2/Keap1通路有关。
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