【摘 要】
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研究尝试将湿法超微粉碎系统、膜分离系统、分子排阻系统三者耦合,纯化获取高纯度纤溶活性地龙蛋白.采用二维电泳技术分析地龙总蛋白分布,进而确定最佳膜分离孔径.结果表明,
【机 构】
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南京中医药大学中药复方分离工程重点实验室; 陕西步长制药有限公司;
【基金项目】
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“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09401-308-008,2011ZX09201-201-26):药物新剂型与新技术研究
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研究尝试将湿法超微粉碎系统、膜分离系统、分子排阻系统三者耦合,纯化获取高纯度纤溶活性地龙蛋白.采用二维电泳技术分析地龙总蛋白分布,进而确定最佳膜分离孔径.结果表明,地龙湿法超微粉碎提取液通过膜与凝胶耦合系统纯化后,最终获得了三组高纯度蛋白,其中LK1具有纤溶蛋白活性.LK1通过质谱分析,推测其同源蛋白为:gi|157103994,来是黑斑蚊的占替诺烟酸盐磷酸核糖基转移酶.本次研究相比与目前国内外蛋白纯化方法,蛋白纯化步骤得到了较大的简化,纯化效率得到了很大的提高.说明膜与凝胶耦合纯化蛋白具有一定的可行性.膜与凝胶耦合的研究方法有望推广至其他动物类提取液中蛋白的纯化.
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