【摘 要】
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目的 探讨低渗联合冻干技术改良制备新型脱细胞周围神经支架的可行性,检测其理化性能和细胞相容性,为组织工程化周围神经构建和临床神经修复提供实验依据.方法 在经典Hudson化学脱细胞方法(TritonX-200、Sulfobetaine-10及Sulfobetaine-16)的基础上,采用低渗联合冻干技术改良制备新型脱细胞神经支架.脱细胞完成后采用HE染色及场发射扫描电子显微镜观察支架的组织学结构;
【机 构】
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天津医科大学 总医院 骨科生物力学实验室,天津 300052;天津市天津医院,天津 300211
【出 处】
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天津市生物医学工程学会第三十三届学术年会
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目的 探讨低渗联合冻干技术改良制备新型脱细胞周围神经支架的可行性,检测其理化性能和细胞相容性,为组织工程化周围神经构建和临床神经修复提供实验依据.方法 在经典Hudson化学脱细胞方法(TritonX-200、Sulfobetaine-10及Sulfobetaine-16)的基础上,采用低渗联合冻干技术改良制备新型脱细胞神经支架.脱细胞完成后采用HE染色及场发射扫描电子显微镜观察支架的组织学结构;采用免疫荧光方法检测支架中层粘连蛋白(Laminin)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原存留情况;采用Mimics软件对支架进行孔隙率及空隙直径测定;采用Endure TEC ELF 3200力学试验仪对支架的生物力学性能进行评估;将无血清DMEM与制备好的改良脱细胞神经支架采用国家标准制备浸提液,浸提液体积分数为25％、50％及100％,采用MTT法分析支架浸提液毒性.分离培养兔脂肪基质干细胞(ADSCs),取P3代ADSCs采用PKH-26标记,在体式显微镜下采用显微注射法将标记后的ADSCs种植到上述脱细胞神经支架上;采用HE染色、荧光显微镜、Live/Dead荧光染色观察细胞在支架上生长、存活情况.
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