小鼠骨髓源耐受性树突细胞体外诱导培养及鉴定

来源 :中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会成立30周年纪念大会暨2012年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cccqyu
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  目的:体外诱导培养及鉴定小鼠骨髓源耐受性树突细胞(TDC)。方法:分离小鼠胫骨和股骨骨髓细胞,在含有粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组白介素-4(rmIL-4)的培养基中体外诱导培养7天。结果:流式细胞术分析骨髓源TDC的百分含量,结果显示rmGM-CSF和rmIL-4诱导的CD11b+F4/80+TDC,含量在20%和30%之间,分离纯化后CD11b+F4/80+TDC细胞纯度达90%以上。ELISA法测定TDC培养上清中IL-10和TGF-β水平明显高于LPS诱导成熟的DC培养上清中IL-10和TGF-β水平。免疫组化结果显示TDC在包膜和胞浆中高表达fD0和TLR-2,而CD83的表达明显低于成熟DC。结论:体外诱导培养可获得小鼠骨髓来源TDC,可应用于免疫耐受机制和治疗的动物实验研究。
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