烟草叶片表面抗性蛋白T-phylloplanin基因的克隆和分析

来源 :中国烟草学会,青海省烟草学会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianxiaowei2030
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从烟草突变体T-cldf叶片表达基因的SSH文库中,筛选到一个与真菌抗性相关的表达序列标签PIT10(GenBank Access No.EBl02896)。以PIT10序列为模板设计引物,用末端快速扩增(RACE)技术扩增得到T-Phylloplanin的cDNA全长(GenBank AccessNo.DQ451214)。利用生物软件分析显示T-Phylloplanin基因,包含一个完整的开放读码框,编码一个含有110个氨基酸、等电点为7.74、分子量为11.3kD的小分子量蛋白(GenBank Access No.ABE03627)。其氨基酸残基的不同区域分布有多N-糖基化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-肉豆蔻酰化位点,还有一个跨膜信号肽。通过BLAST比对发现它与烟草叶片的一个表面抗性蛋白全长基因(GenBank AccessNo.AY705384)的同源性为93%。通过半定量RT-PCR分析表明T-Phylloplanin在烟草突变体T-cldf叶片中的表达量高于烟草K346。
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