目的：基因疫苗因可同时诱导特异性细胞免疫和体液免疫，已成为抗感染疫苗设计的良好候选。在前期构建的pcDNA3-VP1基因疫苗以及Chitosan-DNA(pVP1)疫苗滴鼻免疫在小鼠体内诱导特异性体液和细胞免疫预防柯萨奇病毒心肌炎基础上，为进一步提高疫苗效果，引入淋巴细胞趋化因子(Lymphotactin，Ltn)作为基因佐剂。本研究试图比较Ltn与靶抗原VP1构建于同一真核表达载体(共表达)或分别表达于不同载体而后共同免疫(共免疫)的效果。 方法：分别构建了pcDNA3-VP1和pcDNA3-VP1-Ltn、pcDNA3-VP1-linker-Ltn、pcDNA3-VP1-IRES-Ltn三种共表达质粒，加上pcDNA3-VP1+pcDNA3-Ltn共免疫，并以这5组质粒分别与chitosan形成chitosan-DNA复合物，间隔10天4次滴鼻免疫小鼠，比较了诱导的特异性免疫应答和预防病毒性心肌炎效果。 结果：以不同方式构建于pLtn和p-VP1-Ltn、p—VP1-linker-Ltn、p-VP1-IRES-Ltn 3种共表达质粒中的Lptn均可在体外有效表达，并发挥其趋化活性，其中p-VP1-IRES—Ltn质粒表达的Ltn趋化活性最高。 免疫BALB/c小鼠特异性免疫显示：Ltn佐剂以任何方式与靶抗原VPl共构建表达均可增强特异性抗体的诱导，其中Chitosan-p-VP1-IRES-Ltn疫苗能诱导最高水平的血清IgG，而Chitosan-pVP1与Chitosan-pLtn共免疫能产生最高水平的肠道粘膜SIgA，其诱导的分泌IFN的脾脏或肠系膜淋巴结T细胞免疫亦显著高于其他各组。Ltn以任何方式与靶抗原VP1共构建均可增强T细胞免疫，但Ltn与VP1共同构建时，之间插人linker或IRES序列并不能显著增强其T细胞免疫佐剂效果。Chitosan-pLtn效果显著优于pLtn佐剂效果。病毒性心肌炎预防效果亦证实上述结论。 结论：佐剂递送载体和与靶抗原的构建方式可显著性影响其佐剂效果，其机制可能与其有效表达和趋化功能发挥相关。Chitosan-Ltn佐剂质粒与ehitosan-靶抗原质粒共同免疫可显著增强基因免疫诱导的特异性粘膜SIgA和T细胞免疫。