【摘 要】
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为了研究丹参对脂肪变性奶牛肝细胞的作用机制,本文采用胶原酶两步灌流法分离奶牛的肝细胞,用不同浓度的的DL-乙硫氨酸处理,油红染色观察其脂滴数量,甲基噻唑基四唑(MTT)法测
【基金项目】
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河北省自然科学基金资助项目“细胞色素酶P450与奶牛脂肪肝形成关系的研究(编号:C2011204076)”
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为了研究丹参对脂肪变性奶牛肝细胞的作用机制,本文采用胶原酶两步灌流法分离奶牛的肝细胞,用不同浓度的的DL-乙硫氨酸处理,油红染色观察其脂滴数量,甲基噻唑基四唑(MTT)法测定不同浓度DL-乙硫氨酸对肝细胞活性的影响,采用生化分析仪检测细胞裂解液中甘油三酯(TG)含量。用不同浓度的丹参处理变性肝细胞,同样方法油红染色,检测上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、TG、肿瘤细胞坏死因子(TNF-α)及裂解液中(超氧化物歧化酶)SOD、(丙二醛)MDA的含量或活性改变。筛选出2 mmol/L的DL-乙硫氨酸作用于肝细胞24 h作为脂肪肝体外造模的最佳浓度。模型组肝细胞内出现大量脂滴,ALT,AST的活性显著升高,TG含量明显增多。用丹参处理后,能明显降低模型组肝细胞上清液或裂解液中ALT、AST、TG的活性或含量,抑制TNF-α的释放,显著降低MDA含量,增加SOD活性,并使肝细胞内脂滴变小,数量明显减少。丹参对奶牛脂肪肝有一定的治疗作用,其作用机制可能与促进脂质代谢、抑制肿瘤细胞坏死因子及抗脂质过氧化密切相关。
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