鸡传染性法氏囊病病毒Gt株vp5基因缺失株感染性克隆的构建

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luckychuan
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传染性法氏囊病病毒(IBDV)是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Birnaviridae)禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组由A、B两个节段组成,编码4个结果VP1-VP4和非结构蛋白VP5。已有报道,VP5蛋白在病毒复制和体内外致病性中发挥重要作用,其分子机制至今不清楚。本研究利用体外定点突变法,缺失IBDVGt株vp5基因。在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz)。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGG的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtA△VP5HRT,该感染性克隆与pCAGGmGtBHRT共转染DFⅠ细胞。RT-PCR、间接免疫荧光、均显示拯救出了重组IBDV。IBDV非结构蛋白vp5基因缺失感染性克隆的成功构建为从分子水平上深入研究vp5基因功能奠定了基础。
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