论文部分内容阅读
目的 用仓鼠胰岛素瘤细胞(HIT-T15细胞)为靶细胞,以软脂酸造成β细胞脂毒性损伤模型,用PPAR δ特异性激动剂GW501516激动β细胞上PPAR δ,研究PPAR δ对暴露于高脂环境后β细胞线粒体能量代谢和胰岛素分泌的影响,以探讨激活PPAR δ对β细胞可能的保护作用.方法 先用RT-PCR检测HIT-T15细胞上是否表达PPAR δ;在软脂酸浓度分别为0、0.25、0.5 mmol/L或(和)100 nmol/L GW501516培养条件下,用RTQ-PCR检测HIT-T15细胞过氧化物酶体增值物激活受体γ共激活因子(PGC-1α)、核呼吸因子-1(NRF-1)和线粒体转录蛋白(mtTFA) mRNA的表达变化;用酶联免疫法(ELISA)和高效液相色谱检测基础和葡萄糖刺激的胰岛素水平和ATP、ATP/ADP比值的变化;用Western印迹法检测解耦联蛋白2(UCP2)的变化;在软脂酸浓度分别为0、0.25 mmol/L或/和100 nmol/L GW501516培养条件下,透射电镜观察细胞及线粒体形态的变化.