猪肺炎支原体的分离及分子生物学鉴定

来源 :中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rongxiaokun
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从山东某猪场送检的疑似猪支原体肺炎的病猪中用Friss培养基进行了猪肺炎支原体的分离,并对分离菌株进行了PCR鉴定和P46基因的克隆和序列分析,同时对培养物倍比稀释后进行了PCR扩增.结果成功分离到一株猪肺炎支原体,其P46基因核苷酸同源性与J株的同源性最高,为98.47%,将培养物稀到10-5倍后,取500μL提取DNA进行PCR扩增,结果为阳性,从而充分地证明了该分离产物就是猪肺炎支原体.
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分别以酸提取、人工合成等进行了法氏囊素制备研究.以改良溶血空斑试验(PFC)、溶血分光光度测定法和B细胞转化试验,对其进行活性检测,确定法氏囊素的活性检测方法,分析BS对B淋巴细胞作用的特点及作用规律.应用所制备的BS制剂以ND、IBD疫苗免疫雏鸡为模型,研究BS对家禽特异免疫的促进作用,为BS在动物病毒病的免疫与治疗方面的应用提供实验依据.将法氏囊素制剂与抗生素、抗病毒药物配伍,研制分析了其口服
应用国际参考弱毒株A/African Starling/983/79(H7N1)感染SPF鸡胚,收获尿囊液,常规方法甲醛灭活、与白油按一定比例乳化制成4批油乳剂灭活疫苗,对这4批疫苗进行最适免疫剂最、抗体持续期和抗强毒攻击的保护性试验,试验数据表明该疫苗具有良好的免疫原性,一次免疫最适剂量0.3ml,HI抗体可以持续6个月以上,且在免疫后21天,完全保护异源强毒A/FPV/Postock/34(H
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为查明犬副流感病毒(CPIV)对虎的感染情况,应用CPIV细胞培养物为血凝抑制(HI)抗原,对上海、桂林、哈尔滨、宜昌、郑州等地区未曾使用过任何含CPIV疫苗免疫的38只虎的血清进行HI抗体检测.结果表明,有25份血清CPIV的HI抗体效价为1:4~1:32,有13份抗体效价1:2,血清中CPIV的HI抗体阳性率达65.79%,说明上述地区的虎可能存在着CPIV的隐性感染.
目的:克隆并表达中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型菌株IM11的外膜蛋白A(OspA),并对其免疫保护性进行初步研究,为进一步研制莱姆病菌疫苗提供基础.方法:用聚合酶链反应(PCR)从莱姆病螺旋体IM11全基因组DNA中将OspA基因调出,插入原核表达载体P42,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物用SDS-PAGE、Western-Blotting分析.用重组OspA
从临床上采集了899份猪血清样本,用已建立的ELISA检测,根据统计学方法摸清了检测结果的分布规律,并和国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测,检测结果相比较表明,两种方法的符合率为91.73%.利用TG-ROC软件我们确定了NP-ELISA的临界值并标定试剂盒的特异性和敏感性均为92.6%.ELISA的结果判定标准是:当以血清样本L为标准参考阳性血清时,样品与阳
应用F81猫肾传代细胞,从高热、拒食和间有神经症状的死亡虎病科中分离获得者株病毒,经形态学、理化学、生物学和血清学系统鉴定,证明为1株流感病毒.采用流感病毒核蛋白基因引物,对分离病毒及该虎病料进行RT-PCR扩增和序列分析,结果从分离病毒和虎病料理中均扩增出与理论值大小相符的464bp基因片段,其序列与A、B、C三型流感病毒相比较,同源性分别为:A型84.9%以上,B型35.0%左右,C型24.8
本研究应用ND-La Sota标准株;IB-H标准株;IBD-B87;经SPF鸡胚繁殖.采用含毒的鸡胚和尿囊液,按一定的比例研制三联苗,经安全、效力等一系列试验,证明该疫苗具有较高的免疫保护率和安全性,能有效的预防鸡新城疫(ND)、鸡传染性支气管炎(IB)、鸡传染性法氏囊(IBD).注射一次疫苗同时能预防三种传染病,减少生产费用和鸡本身的应激反应,从而得到更高的经济效益.
猪链球菌2型引起的链球菌病是一种重要的人兽共患病,猪链球菌2型的生物学特性与其它类型的链球菌即有共同之处,又有其自己的特点.本试验对猪链球菌2型的形态结构、培养特征、生化特性、对动物的致病性进行了系统研究,并建立了对猪链球菌2型及其毒力因子进行检测的二重PCR方法,其敏感性达4×102 CFU/ml.为猪链球菌2型的鉴定以及猪链球菌2型引起的链球菌病的诊断和免疫预防的研究打下了基础.
临床分离的猪链球菌经随机扩增多态性DNA分析,挑选出四株毒力强、免疫原性好且遗传距离较远的猪链球菌作为疫苗株,研制出猪链球菌病氢氧化铝胶多价灭活疫苗.该疫苗对实验小鼠安全性好,无不良反应.实验室的小鼠免疫效力试验证实该苗的保护率为100%,优于单价灭活疫苗和猪链球菌病活疫苗.