99Tc-亚甲基二磷酸盐(99Tc-MDP)对骨性关节炎患者滑膜细胞作用的实验研究

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目的:观察和检测99Tc-MDP对人骨性关节炎患者滑膜细胞增殖、凋亡、炎症和分泌等功能的影响,揭示99Tc-MDP通过调节滑膜细胞治疗骨性关节炎的机制。方法:取骨性关节炎关节置换术患者滑膜组织进行原代培养,细胞培养至第三代时对成纤维样滑膜细胞进行鉴定并用于后续试验;用不同浓度的99Tc-MDP分别培养成纤维样滑膜细胞,选定最佳作用浓度;用MTS法检测99Tc-MDP对成纤维样滑膜细胞增殖的影响;流式细胞术检测99Tc-MDP对成纤维样滑膜细胞凋亡及细胞周期的影响;RT-QPCR和ELISA法测定炎症因子TNFα和IL-1β表达量和释放量;RT-QPCR、ELISA和免疫印迹法检测成纤维样滑膜细胞内炎症信号通路、趋化因子、粘附因子、基质降解酶等的表达变化。结果:经99Tc-MDP培养的成纤维样滑膜细胞较对照组(未经99Tc-MDP培养)中的增殖和凋亡没有显著差异(P>0.05);经99Tc-MDP培养的成纤维样滑膜细胞细胞周期没有明显变化(P>0.05);经99Tc-MDP培养的成纤维样滑膜细胞较对照组内炎症因子TNFα和IL-1β的表达及释放量无显著性差异(P>0.05);经99Tc-MDP培养的成纤维样滑膜细胞内osteoprotegerin的表达较对照组显著下调(P<0.05)。结论:99Tc-MDP可能通过调节骨性关节炎患者滑膜细胞内osteoprotegerin的表达达到治疗骨性关节炎效果。
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