【摘 要】
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目的 建立稳定表达Renilla Luciferase/eGFP双报告基因的小鼠肝癌细胞（Hepa1-6）,进行细胞及活体生物发光成像研究并构建适用于小动物活体成像的肿瘤模型. 方法 构建同时表达荧光蛋白及荧光素酶报告基因的慢病毒载体,感染Hepa1-6细胞,利用流式细胞仪分选eGFP表达阳性的Hepa1-6小鼠肝癌细胞；将筛选后的Rluc-eGFP-Hepa1-6细胞进行细胞生物发光成像并评价其
【出 处】
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中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会
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目的 建立稳定表达Renilla Luciferase/eGFP双报告基因的小鼠肝癌细胞（Hepa1-6）,进行细胞及活体生物发光成像研究并构建适用于小动物活体成像的肿瘤模型. 方法 构建同时表达荧光蛋白及荧光素酶报告基因的慢病毒载体,感染Hepa1-6细胞,利用流式细胞仪分选eGFP表达阳性的Hepa1-6小鼠肝癌细胞；将筛选后的Rluc-eGFP-Hepa1-6细胞进行细胞生物发光成像并评价其发光能力；将阳性细胞扩增后接种于3组裸鼠皮下（共6只）,建立裸鼠皮下移植瘤模型,进行生物发光成像,并进行定量监测肿瘤细胞在体内的生长过程. 结果 成功构建慢病毒载体,并感染Hepa1-6细胞后,荧光显微镜观察细胞eGFP表达,获得Rluc-eGFP-Hepa1-6细胞系,经流式细胞仪筛选得到eGFP表达率大于95％.生物发光成像观察细胞及活体水平,Rluc-eGFP-Hepa1-6细胞荧光素酶表达,其信号强度与细胞数目呈正相关性（细胞生物发光R2=0.999,活体生物发光R2=0.887）,光信号强度能监测肿瘤在体内生长情况. 结论 本研究开发构建Renilla Luciferase/eGFP双报告显像的慢病毒载体,成功感染Hepa1-6小鼠肝癌细胞,体外以eGFP表达水平评估转染效率、进行筛选；同时应用活体生物发光系统构建的裸鼠皮下移植瘤模型为研究肿瘤体内生长、转移、治疗提供了理想的模型；为进一步研究肿瘤治疗效果提供了良好、无创的定量示踪手段.
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