贝莱斯芽孢杆菌HN-2的分离鉴定及抑菌活性研究

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HN-2菌株为本实验室分离得到的一株生防细菌,为探究生防细菌HN-2的分类学地位以及明确HN-2发酵液中主要抑菌活性化合物的种类。通过采用形态学观察结合现代分子生物学的手段对生防菌HN-2进行分类鉴定,同时运用各种提取方式提取生防菌HN-2发酵上清液中的活性物质,以杧果炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz)作为靶标进行活性测试、利用飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对有活性的正丁醇提取物进行组分分析,同时采用聚合酶链式反应(PCR)对HN-2菌株中合成脂肽类物质的合成与调控基因进行检测、比对、构建系统发育树,并且初步测试HN-2菌株正丁醇提取物在杧果上的保护作用。结果表明HN-2菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),其发酵上清液的正丁醇萃取得到的粗提物活性最好,抑菌圈大小为20.93±0.3 mm,半最大效应浓度(EC50)为70.62μg/mL;通过飞行时间质谱数据结合基因检测的结果分析发现正丁醇提取物中主要活性成分为脂肽类物质,其中含有表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturins)和泛革素(fengycin)等;通过显微观察发现正丁醇粗提物可以明显抑制杧果炭疽病菌的生长,HN-2正丁醇提取物处理后的杧果15d内未出现杧果炭疽病病状,对杧果果实具有较好的保护作用。贝莱斯芽孢杆菌HN-2的主要活性物质为脂肽类物质,其对植物病原真菌有较好的防治效果,具有进一步深入研究和开发应用的潜力。
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