【摘 要】
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研究背景:金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是金黄色葡萄球菌分泌的一组细菌外毒素。SE主要分为SEA、SEB、SEC、SED、SEE、SEG、SHE和SEI等11种血清型。
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研究背景:金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是金黄色葡萄球菌分泌的一组细菌外毒素。SE主要分为SEA、SEB、SEC、SED、SEE、SEG、SHE和SEI等11种血清型。SEA引起的脓毒血症在细菌性脓毒血症中占有很高的比例。传统的检测方法 ,如反向被动乳胶凝集法( RPLA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫荧光技术等,由于灵敏度较低,导致其应用受到了很大的限制。目的:建立具有高度灵敏的微孔板式CLEIA检测SEA的方法,并检测在多种基质中SEA的敏感性.方法:制备、纯化效价高、特异性强,识别不同表位组的两株单抗,抗SEA m Ab No.33和No.2组成抗体配对.No.2 m Ab标记辣根过氧化物酶(H RP),为检测抗体,No.33作为包被抗体.结果:成功建立了高度敏感、特异检测SEA的CLEIA方法 ,检测抗体稀释液和小牛血清中SEA,检测灵感度3.2 pg/m L,定量线性范围3.2~640pg/L,批内与批间变异系数(CV)均小于<12%,回收率85%~110%.检测50 g/L脱脂牛奶、血清、尿液和自来水中的SEA,灵敏度5pg/m L,定量线性范围5~1000 pg/m L.与SEB、SECI和SED均无交叉反应.结论:本CLEIA方法测量准确,灵敏度高,特异性好,在食品工业及临床标本检测中有广阔的应用前景.
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