【摘 要】
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本研究旨在探索IMP1在弓形虫不同阶段的表达特性及其免疫原性.通过基因克隆技术以弓形虫RH株为模板成功获得了TgIMP1序列,进行原核表达、纯化,将制备的兔源多克隆抗体用于间
【机 构】
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浙江大学动物科学学院动物医学系,杭州310058
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究旨在探索IMP1在弓形虫不同阶段的表达特性及其免疫原性.通过基因克隆技术以弓形虫RH株为模板成功获得了TgIMP1序列,进行原核表达、纯化,将制备的兔源多克隆抗体用于间接免疫荧光技术对不同时期IMP1蛋白的表达特性进行研究.选取20g左右ICR小鼠,随机分为4组,每组20只,分别灌胃生理盐水及含有pcDNA3.1-IMP1、pcDNA3.1-SAG1-IMP1和pcDNA3.1的减毒沙门氏菌),按照每次200μi(107cfu)菌液进行免疫.研究结果发现在游离、吸附于细胞表面、入侵中、入侵后及纳虫空泡中的速殖子IMP1均有表达,均被定位于虫体表面,且在有些虫体的顶端表达更为强烈.免疫保护性试验结果表明ZJ111/pcDNA3.1-IMP1、ZJ111/pcDNA3.1-SAG1-IMP1核酸苗具有良好的免疫原性,可以诱导小鼠产生较强的体液及细胞免疫应答,其中IgG2a、IFN-γ水平与对照组比显著上升(p＜0.05),动物保护性试验结果表明二价核酸疫苗ZJ111/pcDNA3.1-SAG1-IMP1的免疫保护效果要显著好于单价核酸疫苗ZJ111/pcDNA3.1-IMP1(p＜0.05).研究提示TgIMP1可在弓形虫多个阶段进行表达,其核酸疫苗对实验感染弓形虫的小鼠有一定的免疫保护力,为研制抗弓形虫疫苗提供基础和思路.
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