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设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1基因,将NS1基因插入到蹭转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK-NS1.将pUSK-NS1与伪狂犬病毒Ea株TK<->/gG<->/LacZ<+>突变株基本组共转染真核细胞IBRS-2,通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒TK<->/gG<->/NS1<+>.经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白.该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株.