【摘 要】
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目的:观察PLGA纳米颗粒在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分裂过程中分配规律,考察载紫杉醇PLGA纳米粒(PTX-PLGA-NP)对MSCs增殖、分化的影响. 方法:通过末端基团活化缩合成酰
【机 构】
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浙江大学城市学院医学院药学系 310015,浙江,杭州
【出 处】
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浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛
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目的:观察PLGA纳米颗粒在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分裂过程中分配规律,考察载紫杉醇PLGA纳米粒(PTX-PLGA-NP)对MSCs增殖、分化的影响.
方法:通过末端基团活化缩合成酰胺,用小分子荧光标记PLGA,通过乳化-溶剂扩散法制备PLGA纳米粒.激光共聚焦观察纳米粒胞内分布、细胞分裂过程中的外排及向子代细胞分配的规律.测定PTX-PLGA-NP粒径分布、载药量及包封率,绘制体外释放曲线.HPLC-MS测定胞内PTX浓度,MTT法、流式细胞仪测定PTX-PLGA-NP对MSCs增殖的影响;诱导细胞成骨分化,考察PTX-PLGA-NP对MSCs定向分化能力的影响.
结果:PTX-PLGA-NP平均粒径为149nm，分布均匀，载药量5％左右，包封率95.2，缓释效果大于10d。PLGA纳米粒内吞后主要分布于溶酶体，随细胞分裂平均分配到子代细胞中。3d内纳米颗粒约排出总量的30％，外排过程集中在细胞间期。PTX对MSCs存在一定程度的抗增殖活性，可逆地改变细胞周期，但在较大的浓度范围内不造成细胞死亡。PTX胞内浓度约为30pg/cell的情况下撤药后，培养3-5天可逐渐恢复G2/M期细胞比例，恢复增殖能力。MSCs仍保持成骨分化能力，细胞ALP分泌水平和钙化结节生成不受影响。
结论:缓释纳米粒可被MSCs在细胞间期部分外排，随细胞分裂平均分配到子代细胞。PTX-PLGA-NP胞内浓度低于30pg/cell时，对MSCs的增殖和分化不产生影响。
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