同亚型抗血清参考品在甲型H7N9流感病毒血凝素含量检测中的适用性研究

来源 :2013中国药学大会暨第十三届中国药师周 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhoubin506
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目的:在无甲型H7N9流感病毒特异性抗血清的情况下,考察现有的H7亚型抗血清用于单向免疫扩散试验(SRID)的适用性,以建立应急情况下检测抗原含量的方法.方法:获得NIBSC已有的四种H7亚型抗血清参考品,对其制备用毒株与H7N9毒株的血凝素序列进行对比,之后通过双向免疫扩散试验比较其效价,根据同源性比对结果及双扩效价确定适用的抗血清,并以SRID方法验证检测H7N9抗原的可行性.结果:从NIBSC获得了四种抗H7亚型的抗血清,分别针对H7N1,H7N2,H7N3,H7N7亚型病毒.A/Anhui/1/2013与A/mallard/Netherlands/12/2000(H7N3)血凝素蛋白序列同源性达到97.14%,与A/chicken/Italy/13474/99(H7N1)血凝素蛋白序列同源性为96.25%,而与另外两株同源性较低.NIBSC 07/278号抗血清参考品(H7N3亚型)与H7N9抗原的双扩效价达到1:8.在1.5%的琼脂糖凝胶中分别加入30μl、的抗血清进行进行SRID试验,时形成的沉淀线清晰,便于准确测量沉淀环直径,与其对应的血凝素浓度进行直线回归后,R2值>0.99.结论:在无H7N9特异性抗血清的情况下,NIBSC 07/278编号抗血清能够用于H7N9疫苗的血凝素含量的应急检测.
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