【摘 要】
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目的：克隆并原核表达补体C3a基因。方法：采用RT-PCR法以总RNA反转录产物为模板,扩增C3a基因,克隆后构建原核表达质粒pET-28a-C3a,转化至E.coli BL21(DE3),加入IPTG诱导表达
【机 构】
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人兽共患病研究教育部重点实验室吉林大学人兽共患病研究所畜牧兽医学院 吉林长春130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十二届学术研讨会
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目的：克隆并原核表达补体C3a基因。方法：采用RT-PCR法以总RNA反转录产物为模板,扩增C3a基因,克隆后构建原核表达质粒pET-28a-C3a,转化至E.coli BL21(DE3),加入IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析蛋白表达状态.结果：PCR扩增出长度为231bp的目的基因,所构建的重组表达质粒经测序证实序列正确,并可成功诱导表达分子量为8.89kDa的基因工程C3a蛋白,经SDS鉴定分析表达形式为包涵体表达.
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