【摘 要】
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根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计引物,对雷公藤悬浮细胞磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate3-phosphatase,PTEN)基因进行cDNA
【机 构】
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首都医科大学中医药学院中医络病研究北京重点实验室,北京1000692
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根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计引物,对雷公藤悬浮细胞磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate3-phosphatase,PTEN)基因进行cDNA全长克隆,通过生物信息学方法对得到的PTEN基因进行分析,主要包括多重序列比对,蛋白结构预测和构建进化树分析等.根据分析结果TwPTEN基因全长为2247bp,共编码614个氨基酸,等电点为5.84,相对分子质量为66.9kDa,多重序列比对显示其与其它植物的PTEN基因具有较高的同源性.雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后,实时荧光定量结果显示,TwPTEN的表达量明显增加,并在12h达到最高,提示PTEN基因与植物的次生代谢产物的生产有关.本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到PTEN基因,为进一步研究雷公藤PTEN基因的功能奠定基础.
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