研究背景:肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)中含有较多肿瘤特异的CTL。应用TIL治疗恶性黑色素瘤取得了很大成功,但鲜有报道将TIL应用于其它肿瘤的治疗。越来越多的证据表明,淋巴瘤是免疫原性很强的肿瘤,应用抗PD-1抗体及CAR T细胞治疗淋巴瘤都取得了良好的效果。本研究尝试应用TIL治疗了难治复发的B细胞淋巴瘤,为淋巴瘤的治疗提供新方法。目的:应用环磷酰胺联合氟达拉滨化疗预处理后,回输自体TIL对难治复发B细胞淋巴瘤的治疗效果。方法:3例多次化疗及美罗华靶向治疗后无效的患者,其中2例为套细胞淋巴瘤,1例为弥漫大B细胞淋巴瘤。在末次化疗后病情的稳定期,手术切除浅表肿大淋巴结。肿瘤组织在GMP实验室中用混合消化酶消化为单个细胞,密度梯度离心获取单个核细胞。初始应用X-VIVO培养基+IL-2培养TIL细胞,待TIL增殖一定数量后,应用CD3单抗联合IL-2大量快速扩增TIL。待细胞生长至5×109数量级,收取细胞,内毒素及微生物检测合格后回输给患者。TIL回输前6 d给患者应用如下的化疗方案:CTX:1.6,D1-2;Fludarabine:50 mg,D1-4。TIL回输后应用IL-2静脉滴注200万U/d。TIL培养前、培养中及培养后应用流式细胞仪分析CD5,CD10,CD19,CD20,CD3,CD4,CD8,CD56的表达情况。结果:3例患者均能成功大量培养TIL细胞,培养前以B细胞为主,培养后TIL细胞CD3+比例达98%以上。TIL中的CD4/CD8细胞比例为1.27/1。化疗后3例患者均出现了IV度骨髓移植,对症处理后均完全恢复。患者平均接受的TIL回输量为6.3×109,TIL回输后无明显不良反应,3例患者均出现了与静脉点滴IL-2相关的中度发热。最早治疗的一例套细胞淋巴瘤患者肿瘤完全消失已持续2年2个月,另外两例患者肿瘤部分缩小,已分别持续5个月和2个月。结论:难治复发淋巴瘤患者的TIL易于扩增。化疗预处理后应用TIL治疗难治复发淋巴瘤有效率高,副作用小。