HPLC-ECD检测儿茶酚氧甲基转移酶活性的方法学研究

来源 :2008年全国生物医药色谱交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ywyyang
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采用高效液相色谱电化学检测法(HPLC-ECD),以3,4-二羟基苯甲酸为反应底物,在镁离子的作用下,S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,测定产物香草酸,建立儿茶酚氧甲基转移酶(COMT)活性的测定方法。以01M/LNa2HPO4缓冲盐(pH=3.3)-甲醇(83/17,v/v)作流动相,在流速1.0ml/min,柱温30℃,550mv电压,以C8柱为分析柱,检测产物的生成量。方法的线性范围在2ng/ml-300ng/ml之间,相关系数为0.9993,最低检测限为lng/mL(S/N≥3),回收率为99.47~101.82%。本方法快速准确,灵敏度高,可用于测定组织和红细胞中COMT的活性。
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