【摘 要】
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背景：广州管圆线虫病主要的临床表现为嗜酸性脑膜炎.我们在前期的蛋白组学研究中也证实广州管圆线虫半乳糖凝集素1在V期幼虫和成虫时是上调表达,人类和鼠的半乳糖凝集素被
【机 构】
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温州医科大学基础医学院寄生虫实验室,浙江温州,325035
【出 处】
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2015年浙江省医学会热带病与寄生虫病学分会学术会议
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背景：广州管圆线虫病主要的临床表现为嗜酸性脑膜炎.我们在前期的蛋白组学研究中也证实广州管圆线虫半乳糖凝集素1在V期幼虫和成虫时是上调表达,人类和鼠的半乳糖凝集素被证实是有免疫下调的作用,广州管圆线虫的半乳糖凝集素可能是针对该病的免疫性损伤的治疗靶标.但是广州管圆线虫半乳糖凝集素尚缺乏完整的蛋白表达和功能方面的研究.方法：本研究先是利用生物信息学方法分析了广州管圆线虫半乳糖凝集素1与其他物种半乳糖凝集素的同源性和进化距离,而后克隆到原核表达载体pColdⅢ中,并在大肠埃希菌BL21中利用IPTG(0.1-1.0mM)低温(15℃左右)诱导表达；利用镍柱纯化重组表达蛋白；用纯化蛋白免疫小鼠4次,每次间隔1周,每次剂量60ug,三次加强免疫后用小鼠血清经免疫印迹分析其免疫原性,同时检测重组蛋白对小鼠血细胞的凝集反应性.结果：生物信息学分析显示广州管圆线虫半乳糖凝集素1与其他物种的半乳糖凝集素具有相同的保守域,属于半乳糖凝集素超家族.重组半乳糖凝集素1在原核表达载体pColdⅢ中于15℃,1.0mM IPTG时高表达,每100ml培养液能纯化到2mg蛋白.重组蛋白具有良好的生物学反应性,能凝集小鼠血红细胞.结论：本研究首次实现广州管圆线虫重组半乳糖凝集素1的高表达,纯化简单,初步探索其生物学反应性,为进一步研究该蛋白在免疫调控方面的研究奠定了基础.
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