人多能干细胞分化的DA神经元移植能否存活、带来长期的行为学改善并有较高的安全性是决定DA细胞移植能否治疗PD的关键.为此，我们需要有开发临床级别的多能干细胞，高效的分化方案及对细胞移植的系统性和长期性评价.我们发现，临床级人孤雌胚胎干细胞系(hPESC)可高效的向神经系统及DA神经元的分化，能够分化为不同时期、不同亚类的神经细胞及具有正常的电生理活动DA神经元.为探索提高神经分化的有效方案，我们通过改变细胞基质条件，在不同的基质上进行神经分化.我们发现，基质的硬度本身不影响神经分化，但生长面的特征，如表面粗糙度等，会影响基底对基质蛋白的吸附量.在一定范围内，孔隙大的生长面呈点状吸附基质蛋白，可以促进神经分化，并可以在分化早期提高SHH信号与Wnt信号的强度，促进中脑多巴胺神经元的分化.我们将hPESC分化的神经干细胞、不同亚类的DA神经元移植入MPTP诱导的猴模型中，并进行长期的跟踪观察.通过影像学和血液免疫指标，在所有长期存活的14只猴中，未显示有肿瘤发生.在移植后3-4月内，早期神经干细胞、不同分化方案所得TH+神经元移植均带来一定的行为学改善.超过3月后，部分接受细胞移植的PD猴症状出现反弹.MRI显示，这些重新出现症状的PD猴脑内细胞移植部位偏差较大.对部分移植猴取材进行切片显示，移植细胞可以存活、成熟并有一定范围的迁移.免疫荧光显示部分移植细胞能够进一步分化为DA神经元，合成TH.在脑片的纹状体、黑质等部分取组织进行HPLC分析，结果显示，正确的细胞移植部位、TH表达程度、及行为学检测结果具有明显的相关性.因此，尽管各猴之间行为学改进的程度差异较大，这种差异同时反应了临床上PD发病的异质性及影响因素的复杂性.上述发现表明，细胞移植治疗这类神经退行性变影响因素较大，需要进一步增加样本进行长期、系统的研究.