【摘 要】
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性别控制和性别分化对于家禽生产具有十分重要的意义.Foxl2是最早发现的哺乳动物的卵巢分化标记,对卵巢发育和维持具有重要作用.使用DNA重组技术构建逆转录病毒介导的Foxl2基
【机 构】
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华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,湖北武汉430070
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性别控制和性别分化对于家禽生产具有十分重要的意义.Foxl2是最早发现的哺乳动物的卵巢分化标记,对卵巢发育和维持具有重要作用.使用DNA重组技术构建逆转录病毒介导的Foxl2基因RNA干涉载体,以Foxl2全序列信息设计shRNA序列,以白来航鸡基因组DNA为模板进行PCR扩增,扩增条带为358bp,用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切PCR产物及pSLAX13-GFP穿梭载体,回收、纯化、连接得到pSLAX13-GFP-shRNA,用ClaⅠ分别酶切pSLAX13-GFP-shRNA和RCASBP(B),回收、纯化、连接,PCR鉴定正向连接的重组载体,并测序验证.测序结果与预期一致,没有碱基的突变,说明RCASBP(B)-GFPshRNA重组载体构建成功,此载体可以进行Foxl2基因功能的研究。
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