捻转血矛线虫-胃癌细胞共培养模型的建立及互作研究

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捻转血矛线虫早期感染会引起宿主胃组织的病理反应,诱发宿主的早期免疫应答,如表达分泌警报因子,敦促宿主尽快建立完整的Th2型免疫保护力。本试验旨在建立捻转血矛线虫体外培养模型,并在此基础上研究体外线虫感染早期免疫应答。使用细胞小室构建捻转血矛线虫-胃癌细胞气液界面共培养系统,通过观察线虫的生活方式、食物来源和形态特征验证共培养系统的可靠性,并记录线虫与细胞的生存状态和检测细胞中警报因子的表达量研究体外早期免疫应答。结果显示,捻转血矛线虫在共培养系统中以弦运动和圆运动的方式生活。细胞远红外荧光染色结果显示线虫以细胞蛋白为食维持基本营养,进食的方式可能为叮咬胃癌细胞后吸食。脱鞘幼虫在体外培养系统中生长发育速度缓慢,共培养0 d、4 d和7 d时的虫体长度分别为981.5±24.3μm、1113.9±24.4μm和1157.0±47.6μm,其中7 d时与宿主感染4 d体内的虫体大小相似。捻转血矛线虫和细胞在共培养系统中互相胁迫,随着共培养时间的增加,线虫呈现活力下降和蜷缩状的生理状态,同时贴壁细胞逐渐从胶原板脱落并进入坏死状态。相较于共培养0 d时,共培养4 d时胃癌细胞MGC坏死的比例由12.91%增加到53.25%,胃腺癌细胞BGC坏死的比例由2.63%增加到24.81%。线虫还能诱导细胞表达大量的IL-33,MGC与线虫共培养4 d和7 d时IL-33的表达量分别上升至共培养0 d时的2.520倍和4.180倍,BGC与线虫共培养4 d和7 d时IL-33的表达量分别上升至共培养0 d时的1.732倍和5.150倍,这与宿主早期感染时IL-33的高表达一致。本试验成功建立了捻转血矛线虫与胃癌细胞体外共培养模型,通过研究线虫与细胞的相互作用分析了早期感染对宿主造成的损伤和诱发的免疫应答,为阐明体内早期免疫应答的分子机制提供了参考。
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