目的建立基于药效物质基础的人工虫草质量评价方法-。方法 1.考察15种人工虫草菌丝体水提物及多糖对巨噬细胞功能的影响,评价指标包括MTT法考察细胞增殖能力,Griess试剂检测NO释放,流式细胞术检测巨噬细胞吞噬能力,以及ELISA法检测细胞因子IL-1α,IL-1β,IL-10和TNF-α等释放。2.对活性人工虫草多糖分别以13种内切糖酶水解结合色谱分析,考察人工虫草多糖经酶解后高效体积排阻色谱分析的色谱响应特征,以及酶解产物柱前衍生化高效液相色谱分析所获得的特征糖谱,进行活性虫草多糖特征分析。结果 15个被测样品中仅有3个人工虫草(UM01,QH11JC和BNQ)水提物具有明显增加巨噬细胞功能的作用,可促进RAW264.7巨噬细胞增殖,增加其NO、IL-1α、IL-1β、IL-10和TNF-α等释放;活性追踪发现多糖是人工虫草免疫增强作用的主要活性部分;人工虫草活性多糖的主要特征是:(1)以(1→6)-α-葡萄糖苷键为共有特征,尚有(1→4)-β-和(1→4)-α-D-葡萄糖苷键;(2)虫草多糖的免疫活性可能与其分子量有关,免疫活性最强的人工虫草多糖分子量主要分布于80-410kD。结论多糖是人工虫草免疫调节的主要活性成分,应作为人工虫草质量评价指标;利用内切糖酶水解结合色谱分析建立的特征性糖谱,可为人工虫草多糖质量评价提供新方法。