缺氧诱导体外培养的大鼠胚胎脑皮质神经干细胞增殖和代谢性谷氨酸受体表达的研究

来源 :中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议(The 7th Biennial Meeting and the | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangbin
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  目的 脑缺血缺氧损伤后产生各种生长因子和神经递质可诱导在体神经干细胞增殖、迁移和分化,有可能促进损伤修复和神经功能重建.近年的研究提示代谢性谷氨酸受体(mGluRs)可能在正常神经发生和缺血缺氧损伤后的神经发生中发挥着重要作用.本研究应用体外培养技术,研究缺氧损伤对神经干细胞增殖的影响,探讨缺氧损伤后神经干细胞mGluRs的表达变化规律.方法 分离大鼠E15.5d胚胎脑皮质,采用无血清体系,体外培养成神经干细胞球.nestin、Tuj1、GFAP和O4免疫荧光染色鉴定培养的神经干细胞;培养的神经干细胞球置入含95% N2,5%CO2的厌氧培养箱中制备缺氧模型,分别缺氧处理3h、6h、12h和24h后再转入普通CO2培养箱中,进行常氧培养;应用MTT分析,克隆形成率,神经干细胞球直径测量方法显示神经干细胞增殖数量变化;流式细胞术分析细胞周期变化,Western Blot分析细胞周期素D1(cyclinD1)表达变化.实时定量PCR测定神经干细胞的mGluRs mRNA表达变化;One-Way ANOVA方法统计分析实验数据.
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