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稻曲病菌[Ustilaginoidea virens(Cooke)Tak.]次生代谢产生的稻曲毒素( Ustiloxins)是一类具有阻断真核细胞有丝分裂活性的环肽毒素,有较强的细胞毒性,对人畜和植物有毒害作用,已成为稻米食用安全的突出问题.目前,至少已经分离、鉴定了5种稻曲毒素,其中,稻曲毒素A(Ustiloxin A)是主要的成分,占毒素总含量的80%左右.实验室利用双元载体pBHt2和农杆菌SK1044成功构建了稻曲病菌农杆菌介导的T—DNA高效遗传转化体系,构建获得了12 000余个突变菌株,并完成突变体库评价和田间致病力检测.本研究以接种稻曲病菌突变体致病获得的402份稻曲球样品为实验材料,采用高效液相色谱(HPLC)检测稻曲球中的毒素A含量,筛选出4个产毒能力突变的突变菌株,分别是1025、1605、1623、1641,并对其进行了生物学性状分析及其T-DNA插入位点分析.研究结果表明,与野生型菌株P-I相比,突变菌株1025、1641在TB3、MM培养基中生长速率均显著降低,在PBA培养基上差异不显著,H2O2胁迫对1025生长抑制显著;突变菌株1025、1641产孢量显著减小,1605、1623产孢量变化不显著;H2O2对供试稻曲病菌产孢均有抑制作用,其中对Pl的产孢抑制率最大,对1641产孢抑制率最小.Southern杂交结果显示T-DNA在菌株1025中以单拷贝形式插入,在菌株1623、1641中以双拷贝形式插入,利用HiTail-PCR分析菌株1025插入位点侧翼序列发现侧翼片段丢失严重,结果还需要多次试验进行验证.