H1N1型猪流感病毒HA1重组乳酸菌的制备及免疫保护效果研究

来源 :第二届全国微生态制剂研究开发与综合应用新技术、新设备交流研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dxlwwh
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  目的:探讨猪流感病毒HA1重组乳酸菌对小鼠免疫功能的影响。方法:设计并构建HA1基因的原核表达载体,电转到乳酸菌中,筛选出阳性菌落进行SPPIP诱导表达,SDS-PAGE和Western检测目的条带。将重组乳酸菌免疫小鼠,并设计对照组,免疫二周后,接着攻毒,观察一周,在这期间,计算存活率和增重率,应用HI和ELISA检测鼠血清中的抗体水平;取肺脏和气管,观察病理学变化;应用流式细胞仪检测脾脏和淋巴结中的CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD19+B细胞、CD11c+DC、IL-12、IFN-Y的表达水平。结果:构建了HA1原核表达载体,且HA1基因在乳酸中获得了表达。重组乳酸菌免疫后小鼠的存活率、增重率、血清抗体水平显著高于对照组;实验组的小鼠肺脏和气管的炎症反应比对照组明显减轻;待检的各种细胞因子水平也显著高于对照组。结论:重组乳酸菌能增强小鼠的全身免疫应答,产生特异性的免疫保护作用。粘膜免疫是抵抗病毒的重要防线,因此重组乳酸菌提高能粘膜免疫对于控制和预防猪流感的感染有重要的意义和潜在的利用价值。
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