【摘 要】
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分别以纤维素和葡萄糖为唯一碳源,液体培养基中菌丝纯培养,利用差异转录组学和蛋白组学分析纤维素酶基因的转录与表达水平差异,共获得了7个在转录和蛋白水平都有很高丰度的新
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分别以纤维素和葡萄糖为唯一碳源,液体培养基中菌丝纯培养,利用差异转录组学和蛋白组学分析纤维素酶基因的转录与表达水平差异,共获得了7个在转录和蛋白水平都有很高丰度的新茯苓纤维素酶及其基因,其中5个为纤维素内切酶、1个为纤维素外切酶、1个为葡萄糖苷酶。利用大肠杆菌表达系统,获得其中4种基因的重组表达并纯化得到了高纯度的重组酶。另外,建立2种重组内切酶的酵母高密度发酵体系,高密度发酵条件下重组内切酶的表达量达3g/L,获得的重组蛋白经质谱进行了验证并利用HPLC证实了重组酶具有生物活性。本研究为挖掘酶活性强且稳定性高的茯苓纤维素酶基因并建立高效重组酶的生产奠定了基础。
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