miR-155-5p在辐射诱导肺上皮间质转化中的作用研究

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放射性肺纤维化(radiation-induced pulmonary fibrosis,RIPF)是放射治疗乳腺癌,肺癌等疾病的最常见的并发症,并且这一过程是不可逆的。其主要特征是在胸部放疗时,可能存在过度修复,并在这过程中多种功能细胞和炎性介质的相互作用引起大量成纤维细胞产生和细胞外基质(EMC)沉积,最终导致肺组织纤维化。而有大量的研究表明肺上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是造成肺纤维化的效应细胞——成纤维细胞的一个重要来源。EMT是指分化的上皮细胞失去粘附和上皮标志物并转化为间充质细胞,增加细胞迁移和侵袭能力的过程,很多文献证实EMT与细胞增值、凋亡、肿瘤发生、器官纤维化有很大关系。已有文献报道辐射可以诱导EMT,并导致放射性肺纤维化发生,但其发生机制不明。miRNA是调节蛋白质表达的重要非编码RNA,长度为大约20nt左右,它可以通过结合靶基因的3个UTR区域使蛋白表达沉默,它可以参与很多生理过程,如增殖,分化,迁移,疾病的发展和进展,其中可能参与肺纤维化的调控,但它在电离辐射诱导的肺纤维化中的作用机制尚不清楚,这值得进一步研究。miR-155-5p是我们在前期肺上皮间质转化模型中筛选到的一个低表达miRNA,为了揭示miR-155-5p在RIPF中的作用机制,我们首先将肺上皮细胞BEAS-2B和A549经6Gy60Coγ射线辐照,分别在0 h、6 h、48h收RNA行RTPCR检测辐照后miR-155-5p的表达,结果显示miRNA-155-5p随着辐照后时间的延长明显降低。随后我们向A549和BEAS-2B细胞转染miR-155-5p抑制剂,Western blot检测EMT相关蛋白,结果显示上皮标志蛋白降低,而间质标志物升高,说明敲低miR-155-5p可能诱发肺EMT,提示miR-155-5p可能是参与RIPF调控的一个新的miRNA,可能成为治疗RIPF的新靶点。
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