【摘 要】
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目的:研究知母活性成分(ZMS) 提高毒蕈碱样乙酰胆碱2 型受体(M2 受体) mRNA 基因表达的机制.方法:以转基因的CHOm2细胞系为对象,在培养基中加放线菌素D抑制mRNA合成,不同时间
【机 构】
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上海交通大学医学院,上海 200025
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目的:研究知母活性成分(ZMS) 提高毒蕈碱样乙酰胆碱2 型受体(M2 受体) mRNA 基因表达的机制.方法:以转基因的CHOm2细胞系为对象,在培养基中加放线菌素D抑制mRNA合成,不同时间取样用实时荧光定量RT-PCR方法测定M2 受体mRNA的含量,根据其指数曲线的下降速率,算出其mRNA的半衰期,观察ZMS 对半衰期的影响,并在此基础上,用环己酰亚胺(cycloheximide,CYC)抑制蛋白质的新生时,观察ZMS 调节M2 受体mRNA 半衰期的影响.
结果:无CYC 时,ZMS 使M2 受体mRNA 半衰期显著延长,与对照组相比,分别为4.75h±0.54h和2.13h±0.23h, P<0.05.在ZMS或溶媒作用前4h先加CYC,ZMS的作用消失,两组相比半衰期分别为3.06h±0.23h和3.00h±0.20h, P>0.05.但是如果让ZMS 或溶媒先作用24h 再加CYC,则不能消除ZMS的作用,两组的半衰期分别是5.43h±1.13h 和2.46h±0.09h.结论:ZMS 提高M2受体mRNA的稳定性需要有新的蛋白质合成.
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