【摘 要】
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本文用纯化的牛分支杆菌重组MPT83蛋白作为包被抗原,建立了检测牛分支杆菌抗体的间接ELISA方法.确定了间接ELISA各组分的最适反应条件为:抗原包被浓度为1μg/mL,二抗稀释倍数
【机 构】
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华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会
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本文用纯化的牛分支杆菌重组MPT83蛋白作为包被抗原,建立了检测牛分支杆菌抗体的间接ELISA方法.确定了间接ELISA各组分的最适反应条件为:抗原包被浓度为1μg/mL,二抗稀释倍数为1600倍,血清稀释倍数为60倍,抗原和血清、血清和二抗都是在37℃下反应30min,底物在37℃显色15min,阴阳性临界值定为:D655nm=0.5.通过阻断试验、交叉试验、重复性试验表明该方法特异性强、重复性好.最后用建立的间接ELISA方法对145份结核菌素试验阳性牛的血清和36份结核菌素试验阴性牛的血清进行了检测,结果表明阳性血清的符合率为17.9％,阴性血清的符合率为91.7％.
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