原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果比较

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目的通过比较白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)处理对原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力、炎症因子与炎症通路表达水平变化的影响,为骨关节炎体外研究用细胞提供多重选择。方法免疫细胞化学法与甲苯胺蓝染色分别检测细胞中Ⅱ型胶原与蛋白多糖,鉴定所培养的原代细胞是否为软骨细胞;CCK8法检测IL-1β(10 ng/mL)处理24 h、48h、72 h后对原代软骨细胞增殖活力的影响,IL-1β(1、10、20、40 ng/mL)处理24 h对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力的影响;使用IL-1β(10ng/mL)分别处理原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系细胞24 h,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)与基质金属蛋白酶-13(Matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达水平;Real-time PCR法检测核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA的表达水平。结果结果显示所培养的原代细胞为原代软骨细胞;IL-1β(10 ng/mL)处理可显著抑制原代软骨细胞增殖活力(P<0.05),但IL-1β(1、10、20、40 ng/mL)处理对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力无明显影响(P>0.05);IL-1β(10 ng/mL)处理可使细胞培养上清中IL-6与MMP-13表达水平及NF-κB mRNA的表达量均显著增加(P<0.05)。结论 IL-1β作用下原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系均可表现出OA样炎症反应,二者均可用于OA的体外实验研究。
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