为筛选枯草芽孢杆菌EDR4拮抗相关基因,利用转座子TnYLB-1构建了该菌株的插入突变体库。通过对种子液OD600值、转接培养液一继续培养OD600值及转接培养液二后的孵育时间3个因素设计正交试验,转化过程中加入pMarA质粒的不同量及质粒与感受态细胞共培养的不同时间研究了两种因素对转化效率的影响,确定了pMarA对EDR4的转化体系。通过50℃高温诱导培养产生了EDR4的插入突变体,挑取单菌落2 756个,构建了EDR4的插入突变体库,随机挑选14株突变体经PCR检测转座子TnYLB-1序列,发现转座子已成功插入到EDR4基因组中,进一步通过Southern杂交验证,发现转座子TnYLB-1主要以单拷贝形式随机插入,也有部分多拷贝插入。以油菜菌核病菌为靶标菌,从640株突变菌株中筛选出两株抑菌活性明显下降的突变株,分别为EDR4-T1272和EDR4-T1473,通过生物学特性观察发现转座子的插入未对EDR4生物学特性产生影响,通过PCR验证转座子序列发现转座子可以在突变体中稳定遗传。经过反向PCR扩增出EDR4-T1272、EDR4-T1473转座子插入的侧翼序列,于NCBI上进行Blastn序列比对发现突变体EDR4-T1473中转座子插入基因序列与BS168基因组中糖基化酶基因yvbX有较高的同源性,突变体EDR4-T1272中转座子插入基因序列与模式菌株BS168基因组中假定蛋白编码基因有较高的同源性,推测此两种基因可能与EDR4的抑菌活性相关,基因的具体功能还需要深入研究。