超声联合微泡增强膜密封剂泊洛沙姆188对缺血再灌注损伤心肌的保护作用

来源 :中国超声医学工程学会第五届全国介入超声医学学术交流大会论文汇编 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fdsa5218
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目的心肌缺血再灌注损伤(MIRI)显著降低了心脏在血运重建中的获益。细胞膜损伤是MIRI的重要病理生理机制之一,泊洛沙姆188 (P188)可嵌入受损的膜损伤处。然而既往研究中P188治疗MIRI的效果差异较大。本研究旨在观察P188对发生MIRI心肌的保护作用,拟通过超声靶向微泡爆破(UTMD)来增加进入心肌组织间隙的P188,期望获得理想的疗效。方法(1)采用光密度法和显微镜观察法评价P188对红细胞膜损伤模型的影响;(2)测量P188的粒径与多分散系数、Zeta电位;(3)联合伊文思蓝法与台盼蓝法筛选最佳大鼠超声辐照参数,采用凝胶液相色谱评估拟选用参数是否使P188裂解;(4)将大鼠随机分组,每组5只:假手术组(SHAM)、生理盐水组(NS)、P188组、微泡组(MB)、半量P188组(1/2 P188)、微泡与半量P188组(MB+1/2 P188),建立MIRI模型,测量大鼠心脏梗死区/危险区面积比、心肌肌钙蛋白I含量及心肌细胞凋亡率;测量手术前后左室缩短率差值(ΔFS)与射血分数差值(ΔEF);③镜下观察心脏与肾脏形态学改变。结果(1) Triton(X 100+P188组的红细胞的相对膜破裂率(0.52%0.17%)显著低于阳性对照Triton(X 100组膜破裂率,P <0.05。Triton(X 10+P188组孵育2 h仍可见完整的细胞,孵育12 h未发现完整活细胞;(2) P188的粒径为(3.56 0.03) nm,多分散系数为20.10%0.78%,,Zeta电位为((0.030.75) mV,接近于0 mV;(3)①超声参数为:声压0.5 MPa,频率1 MHz,占空比0.20%,工作/间隙时间比值9 s/3 s,脉冲重复频率10 Hz。②辐照处理组的P188相对分子量分布未发生改变;(4)①MB+1/2 P188组的心肌细胞凋亡率、肌钙蛋白I水平显著低于1/2 P188组,P <0.05,两组心脏梗死区/风险区比值无统计学差异,P> 0.05。②NS组与P188组在ΔEF与△FS上均无统计学差异。③镜下显示NS组、P188组、MB组、1/2 P188组均可见心肌细胞排列紊乱,界限不清,胞浆染色不均匀,伴中性粒细胞浸润;而MB+1/2P188组现象较轻;应用15%250mg/kg的P188后,大鼠肾近曲小管细胞轻微肿胀,内可见空泡样改变,未见坏死征象。结论(1) P188显著减少细胞膜破裂率,但在破膜剂的长时间作用下,P188仍不能保护细胞保持完整;(2) P188可通过肺循环,其静电吸附作用弱,其膜修复作用与静电吸附无关;(3)采用选定的超声参数辐照5分钟,P188不会发生裂解;(4) P188降低了梗死区/风险区比值、心肌肌钙蛋白I水平和心肌细胞凋亡率。UTMD技术的应用有助于P188降低心肌肌钙蛋白I水平和心肌细胞凋亡率。P188对改善大鼠左心室EF和FS无统计学意义。此外,P188使大鼠肾脏近曲小管细胞发生变性。
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