论文部分内容阅读
干扰素是细胞在病毒或其他干扰素诱生剂的作用下产生的一种低分子量的可溶性糖蛋白。当干扰素进入其他未感染的细胞时，可以诱导细胞产生蛋白质，抑制其他病毒复制。Mx蛋白是在Ⅰ型和Ⅲ型干扰素诱导下产生的蛋白质，是继2，5—寡腺苷酸合成酶和P86蛋白激酶后发现的又一种抗病毒蛋白。迄今为止，Mx蛋白已在人、鼠、羊、牛、猪、犬、鱼、禽等体内被发现并行使着重要的功能。羊Mx蛋白分为具有抗病毒活性的Mxl蛋白和缺乏抗病毒活性的Mx2蛋白。Mx1蛋白属于动态蛋白超家族的一类大分子GTPase，特殊的结构赋予了其独特的抗病毒活性，其主要对RNA病毒敏感，对于双链DNA病毒如HBV也有明显的抑制作用，而且该蛋白在体内外均能独立发挥抗病毒活性。本实验利用高保真RT-PCR的方法从中国美利奴绵羊淋巴细胞总RNA中扩增出羊全长MxlcDNA，扩增产物克隆到pcDNA3.1(+)载体上进行测序和遗传进化分析。结果该基因全长1965bp，编码654个氨基酸，与Gen-Bank中报道的羊Mx1蛋白基因相比，存在23个差异位点，其核苷酸同源率98.83％，氨基酸同源率为98.17％。在所比较的几个物种中，中国美利奴绵羊Mxl蛋白基因与牛Mx1蛋白基因亲缘关系最近，与猪、犬、人、猕猴亲缘性相对较近，与鼠、鲋鱼亲缘性较远，与原鸡亲缘性最远。中国美利奴绵羊Mx1蛋白基因与以上动物Mx1.基因核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性分别为94.96％、83.68％、77.69％、78.98％、79.41％、68.43％、55.37％、52.10％和91.74％、79.94％、72.34％、75.08％、75.04％、60.76％、47.97％、42.13％。本研究为羊Mx1蛋白基因体内外表达及抗病毒育种的研究奠定了基础。